Descrição: O objetivo do curso é fornecer ao aluno os conhecimentos teóricos necessários para o entendimento dos mecanismos de regulação da expressão gênica em Escherichia coli, incluindo diferentes mecanismos de controle dos processos de transcrição e tradução. Estes conhecimentos serão aplicados à expressão controlada de proteínas heterólogas em E. coli.
Objetivo Geral: Espera-se que ao final do curso o aluno esteja habilitado a compreender os fundamentos dos mecanismos de regulação da expressão gênica em E. coli, tanto ao nível transcricional quanto traducional. Estes fundamentos serão exemplificados através de aulas práticas, onde o aluno fará o desenho experimental e executará as metodologias necessárias para realizar as etapas de (1) escolha de sistemas e metodologias de expressão adequados ao uso pretendido para diferentes proteínas alvo, (2) clonagem de genes de interesse em vetores de expressão bacterianos sob controle de diferentes sistemas regulatórios, (3) identificação e seleção de recombinantes, (4) otimização das condições de indução, cultivo e solubilidade do produto recombinante, (5) purificação de proteínas através de cromatografia de afinidade (6) testes para determinação da qualidade da proteína recombinante purificada.
O objetivo do curso é fornecer ao aluno os conhecimentos teóricos necessários para o entendimento dos mecanismos de regulação da expressão gênica em Escherichia coli, incluindo diferentes mecanismos de controle dos processos de transcrição e tradução. Estes conhecimentos serão aplicados à expressão controlada de proteínas heterólogas em E. coli.
