Ementa
Objetivo Geral
O objetivo do curso é fornecer ao aluno os conhecimentos teóricos necessários para o entendimento dos mecanismos de regulação da expressão gênica em Escherichia coli, incluindo diferentes mecanismos de controle dos processos de transcrição e tradução. Estes conhecimentos serão aplicados à expressão controlada de proteínas heterólogas em E. coli.
Objetivos Educacionais/Aprendizagem
Espera-se que ao final do curso o aluno esteja habilitado a compreender os fundamentos dos mecanismos de regulação da expressão gênica em E. coli, tanto ao nível transcricional quanto traducional. Estes fundamentos serão exemplificados através de aulas práticas, onde o aluno fará o desenho experimental e executará as metodologias necessárias para realizar as etapas de (1) escolha de sistemas e metodologias de expressão adequados ao uso pretendido para diferentes proteínas alvo, (2) clonagem de genes de interesse em vetores de expressão bacterianos sob controle de diferentes sistemas regulatórios, (3) identificação e seleção de recombinantes, (4) otimização das condições de indução, cultivo e solubilidade do produto recombinante, (5) purificação de proteínas através de cromatografia de afinidade (6) testes para determinação da qualidade da proteína recombinante purificada.
Metodologia
Aulas teóricas: Fundamentos teóricos abordando os mecanismos de regulação da expressão gênica em E. coli; transcrição de RNA e mecanismos de regulação aplicados à expressão de proteínas heterólogas; tradução de proteínas. Estudo de diferentes abordagens para expressão heteróloga em E. coli. Cultivo bacteriano e noções de metabolismo aplicadas à expressão de proteínas recombinantes. Aulas práticas: - Clonagem de genes de interesse em vetores de expressão bacterianos sob controle de diferentes sistemas regulatórios. Serão executadas metodologias referentes à amplificação de DNA por PCR, desenho de iniciadores,
eletroforese de DNA em gel de agarose; extração de DNA plasmidial; digestão de DNA por endonucleases de restrição; ligação de DNA, cultivo de E. coli e estabelecimento de curvas de crescimento, preparo de células
Avaliação
A avaliação será realizada através de apresentação de seminários e relatórios tecnico-científico escrito, ao final do curso.
Critérios de seleção: Carta de interesse, Entrevista e Histórico Escolar
ERRATA: onde lê: Critérios de seleção: Carta de interesse, Entrevista e Histórico Escolar, leia-se Critérios de seleção: Carta de interesse e Histórico Escolar
Pre-requisito: Graduação em andamento
Carga horária total: 340h
Carga horária semanal: 20h
Bolsa auxílio: R$ 400,00
Local de Realização do Curso: Laboratório de Genômica Funcional e Bioinformática
Número de vagas: 01
Início e término do curso: 02/01/2020 a 30/04/2020
O objetivo do curso é fornecer ao aluno os conhecimentos teóricos necessários para o entendimento dos mecanismos de regulação da expressão gênica em Escherichia coli, incluindo diferentes mecanismos de controle dos processos de transcrição e tradução. Estes conhecimentos serão aplicados à expressão controlada de proteínas heterólogas em E. coli.
Objetivos Educacionais/Aprendizagem
Espera-se que ao final do curso o aluno esteja habilitado a compreender os fundamentos dos mecanismos de regulação da expressão gênica em E. coli, tanto ao nível transcricional quanto traducional. Estes fundamentos serão exemplificados através de aulas práticas, onde o aluno fará o desenho experimental e executará as metodologias necessárias para realizar as etapas de (1) escolha de sistemas e metodologias de expressão adequados ao uso pretendido para diferentes proteínas alvo, (2) clonagem de genes de interesse em vetores de expressão bacterianos sob controle de diferentes sistemas regulatórios, (3) identificação e seleção de recombinantes, (4) otimização das condições de indução, cultivo e solubilidade do produto recombinante, (5) purificação de proteínas através de cromatografia de afinidade (6) testes para determinação da qualidade da proteína recombinante purificada.
Metodologia
Aulas teóricas: Fundamentos teóricos abordando os mecanismos de regulação da expressão gênica em E. coli; transcrição de RNA e mecanismos de regulação aplicados à expressão de proteínas heterólogas; tradução de proteínas. Estudo de diferentes abordagens para expressão heteróloga em E. coli. Cultivo bacteriano e noções de metabolismo aplicadas à expressão de proteínas recombinantes. Aulas práticas: - Clonagem de genes de interesse em vetores de expressão bacterianos sob controle de diferentes sistemas regulatórios. Serão executadas metodologias referentes à amplificação de DNA por PCR, desenho de iniciadores,
eletroforese de DNA em gel de agarose; extração de DNA plasmidial; digestão de DNA por endonucleases de restrição; ligação de DNA, cultivo de E. coli e estabelecimento de curvas de crescimento, preparo de células
Avaliação
A avaliação será realizada através de apresentação de seminários e relatórios tecnico-científico escrito, ao final do curso.
Critérios de seleção: Carta de interesse, Entrevista e Histórico Escolar
ERRATA: onde lê: Critérios de seleção: Carta de interesse, Entrevista e Histórico Escolar, leia-se Critérios de seleção: Carta de interesse e Histórico Escolar
Pre-requisito: Graduação em andamento
Carga horária total: 340h
Carga horária semanal: 20h
Bolsa auxílio: R$ 400,00
Local de Realização do Curso: Laboratório de Genômica Funcional e Bioinformática
Número de vagas: 01
Início e término do curso: 02/01/2020 a 30/04/2020