Apresentação

O ensaio SCGE (single cell gel electrophoresis) ou ensaio Cometa sob condições alcalinas é uma técnica eletroforética sensível, reprodutível, simples e rápida para a detecção da presença de quebras de fita única (SSB) e dupla de DNA (DSB), de lesões em sítios álcali-sensíveis e de SSB em sítios de reparo por excisão incompleto, em células de mamífero in vitro e in vivo. O ensaio Cometa possibilita a investigação de dano ao DNA em qualquer tipo celular ou tecido que possa ser submetido ao isolamento de células individuais. Nesta técnica eletroforética, as células tratadas in vitro ou provenientes de tecidos de órgãos de animais são embebidas em gel de agarose em lâmina para microscopia, que são posteriormente lisadas, submetidas a eletroforese e coradas com um corante fluorescente que se liga ao DNA. As células que apresentam danos crescentes no DNA mostram migração aumentada de DNA cromossômico que se assemelha à forma de um cometa. A extensão de migração do DNA indica a quantidade de quebras de DNA na célula.